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人禽流感标本采集及实验室检测技术要点
[ 文章出处:   作者:中国禽流感和流感大流行应对网   录入:江门市疾控中心   更新时间:2008-03-30 ]
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我中心在05年底处理湖南、安徽3例人感染高致性禽流感病例的过程中,对人禽流感病例标本的采集及实验室检测技术有几点体会,供大家参考。

一、尽早采集病人的呼吸道标本

要及时、规范的采集不明原因肺炎或可疑人禽流感病例的呼吸道标本。最佳采集时间为发病后3天内,如错过最佳时间,仍应尽早采集,一般采集7天内标本。如果第一份标本核酸检测阴性,应立即再次采集呼吸道标本。上呼吸道包括鼻拭子、鼻咽拭子、鼻咽抽提物、鼻洗液、咽漱液;下呼吸道标本包括呼吸道吸取物、支气管灌洗液、肺组织活检标本。下呼吸道标本最有利于分离到禽流感病毒。

标本采集后要在病人床旁或现场分装成一式三份,以防止交叉污染,其中两份送中国疾病预防控制中心进行检测、备份与复核。

二、血清标本

如果没采集到用于核酸检测和病毒分离的急性期标本,人禽流感病例的诊断或排除需双份血清,急性期血清在发病后7天内采集,恢复期血清在发病后第234周采集。如未能采集到急性期血清,仍应尽早采集第一份血清,并在间隔24周后采集第二份血清。采集量要求5ml,以空腹血为佳。

三、对于死亡的可疑人禽流感病例尽可能获得尸检标本

若病人死亡,依据《传染病防治法》,做好病人家属的思想工作,同时提前做好准备,尽早进行解剖,采集肺、气管、肝脏等多器官组织标本。

四、开展人禽流感标本采集和检测工作要达到相应的生物安全要求

采集病人的标本要采取二级防护措施,人禽流感标本的处理、实验室检测要在生物安全二级或三级实验室操作。

五、采取适宜的实验室检测方法

具备资质的各省级实验室首先应用RT-PCRRealTime PCR,对采集的上呼吸道、下呼吸道和尸检标本进行禽流感病毒核酸检测。有条件的省份可进行病毒的分离、鉴定和微量中和试验。

六、标本的保存和送检

用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快在24小时内进行检测,24小时能检测的标本可置于4保存,如不能于24小时内接种的标本则应置于-70或以下保存。血清可在4存放3天,-20以下长期保存。标本应避免反复冻融。标本的包装上要注明样本编号、姓名及采样日期。符合上送要求的标本要在24小时内送中国疾控中心。

各省需要向中国疾病预防控制中心送检标本时,应先与中国疾控中心疾病控制与应急处理办公室联系(电话、传真:010-83153724)。具体要求见中疾控疾发[2005]526号文件中《疑似人禽流感/不明原因肺炎病例标本送检、接收、检测和结果报告反馈工作流程》。

 

文稿来源:http://www.pandemicflu.ac.cn/n3520543/n3521106/n3521140/20515.html

 

 

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